鱟試驗法種類及比較

根據(jù)反應機理的不同又可將鱟試驗法分為以凝膠的形成作為指標的凝膠法，以凝膠的濁度變化作為指標的比濁法以及顯色合成基質(zhì)水解顯色作為指標的比色法，其中以定性的凝膠法收載最為普通（表3）。

根據(jù)反應機理的不同，主要可分為以下幾類：

（1）凝膠法（Gel-Clot technique）：可在0.03Eu/ml的范圍內(nèi)進行半定量測定。

（2）比濁法（Turbidimetric Assay）：通常在0.006 ~ 300Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量。

（3）比色法（Colorimetric Assay）：操作比較復雜，但靈敏度和精確度高。通常在0. 006~15Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量。

（4）ELISA（Enzyme-Linked immunosorbent assay）：用鱟試劑與酶聯(lián)吸附免疫測定法聯(lián)合檢定微量內(nèi)毒素的方法。

（5）以巨噬細胞產(chǎn)生的細胞分裂素（Cytodines）：作為機體反應指標的熱原檢查系統(tǒng)。

凝膠法：即在100 x 75mm的小試管內(nèi)，加入待檢樣品的鱟試劑混合。37℃60分鐘保溫反應后，180°倒轉，根據(jù)凝膠形成的有無作為判定指標的一種半定量法。此法操作比較簡單、經(jīng)濟，而且不需要專用測定儀器。可在0.03Eu/ml的范圍內(nèi)進行半定量測量。

比濁法：根據(jù)內(nèi)毒素與鱟試劑的（C因子）反應機理，被激活的凝固酶切斷凝固蛋白原中特定位置的精氨肽鏈。形成凝固蛋白，產(chǎn)生凝膠的濁度變化，適當?shù)臐岫葴y定儀進行定量的一種方法。可分為Endopoint Assay和Kinetic turbidimetric Assay。此法操作簡單、經(jīng)濟、靈敏度高、檢測范圍廣。通常在0. 006~300ET/ml的范圍同時進行定量。但需要專用儀器。

比色法：根據(jù)被內(nèi)毒素激活的凝固酶水解鱟三肽中精氨酸肽鏈。釋放出對硝基苯胺（PNA黃色A405nm）用冰醋酸中止反應進行吸光度測定，或用游離的PNA和偶氮試劑反應，最終形成偶氮藍復合物顯色（紅色A 545nm）而進行比色測定的一種方法。可分為Endopoint Assay和Kinetic turbidimetricAssay。此法操作比較復雜。但靈敏度、定量性和精度都高。通常在0. 006 ~15Eu/ml的范圍內(nèi)進行定量，而且更微量的內(nèi)毒素也可定量。目前主要用在血液﹑體液中的微量內(nèi)毒素的測定方面。