應(yīng)用鱟試驗(yàn)法檢測藥物的內(nèi)毒素含量

藥物作為終產(chǎn)物進(jìn)行內(nèi)毒素LT法檢測是極為適宜的。

美國FDA已將LT法作為法定的藥物內(nèi)毒素的檢測方法。檢測時(shí)，應(yīng)用的鱟試劑其敏感性不得低于0.2EU/mL。并應(yīng)考慮藥物中內(nèi)毒素的耐受限-量（Tolerance limit，其值等于每mg或每ml產(chǎn)物中內(nèi)毒素的允許量)。

如果一種藥品未曾通過LT法（鱟試驗(yàn)法，Limulus test），但卻通過了RT法（家兔熱原試驗(yàn)，Rabbit pyrogen test），則這種藥物亦不能出廠，除非此種RT法由官-方進(jìn)行。有一些藥物，特別是已知有抑制或增強(qiáng)LT反應(yīng)的藥物必須作抑制/增強(qiáng)試驗(yàn)。

應(yīng)用LT法檢測抗生素中內(nèi)毒素的含量是很適宜的。大多數(shù)常用的抗生素如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應(yīng)，故可直接進(jìn)行測定。但亦有一些抗生素溶液能抑制LT反應(yīng)，故必須進(jìn)行抑制試驗(yàn)?？捎米懔康臒o熱原水進(jìn)行稀釋，直至用該抗生素不能抑制LT凝膠作用的最高濃度進(jìn)行試驗(yàn)，所以采用的鱟試劑的敏感度必須等于或超過藥典規(guī)定的熱原試驗(yàn)的敏感度。

這些能抑制LT反應(yīng)的藥物中最典型的是青霉素類藥物，其抑制機(jī)理目前尚不清楚。有人認(rèn)為青霉素的抑制作用是因其對細(xì)菌細(xì)胞壁所含的酶起作用之故；另有人認(rèn)為青霉素對LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結(jié)合率有顯著的相關(guān)、（p<0.01）。如BRL1071青霉素的血清蛋白結(jié)合率最高，它對LT反應(yīng)的抑制作用亦最-強(qiáng)，1.5mmol即能起抑制作用。鹽酸四環(huán)素對LT反應(yīng)亦有抑制作用，其抑制機(jī)理是由于抗生素溶液pH過低（≈4)的緣故。

用LT法測定抗生素中內(nèi)毒素含量比RT法敏感10～100倍。

腫瘤化學(xué)療劑的副反應(yīng)較多，有些與應(yīng)用內(nèi)毒素后相似。因此其不良反應(yīng)可能是由于內(nèi)毒素的污染所致。左旋門冬酰胺酶是由大腸桿菌或歐氏（Erwinia)植病桿菌制備的，由大腸桿菌制備的門冬酰胺酶每1000單位含內(nèi)毒素超過1ng，由歐氏桿菌制備的酶中亦發(fā)現(xiàn)有微量的內(nèi)毒素。另外，博萊霉素，柔紅霉素、長春新堿等藥品，亦有少量的內(nèi)毒素存在，--般為0.1～5ng/ m1。因此，必須對抗腫瘤半成品、成品及加工過程進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測，使藥物中的內(nèi)毒素含量控制在安全水平以下，以減少不良反應(yīng)。

有些抗腫瘤藥有細(xì)胞毒性，不宜采用RT法，因此LT法用于抗腫瘤藥物中內(nèi)毒素的檢測是可行和適宜的。試管法仍為最-實(shí)用的方法。